SOD单位活力怎么计算酶单位unit与mg的换算公式

以检测血液中SOD的活性作为例子：

1．取小鼠新鲜血液500 微升置于4mL 生理盐水中, 混匀, 1500 r/m in 离心5m in, 弃上清液, 将沉淀用生理盐水洗涤3 次, 弃去上清液, 加入2 mL 双蒸水, 搅拌, 然后依次再加入冷乙醇1 mL , 氯仿1 mL , 4000 r/m in 离心15 m in,

弃沉淀, 上清液即为红细胞(RBC) SOD 抽提液, 供测SOD 活性使用.

2． 连苯三酚自氧化速率的测定. 　在3 cm 光径比色皿中加入9 mL 50mmol/L , pH 8. 2 Tris HCL 缓冲液后, 放入721 分光光度计, 于420 nm 处调OD 值为0 作为对照后, 加入适量100mmol/L 连苯三酚溶液搅匀, 以加入时为零点, 每隔30 s 测OD 值一次, 要求自氧化速率控制在0.070 OD/m in 左右.

3． 红细胞SOD 抽提液的活力测定. 　第一测连苯三酚的自氧化速率, 而后向

Tris-HCL 缓冲液中加样, 同时一定程度上减少缓冲液, 使反应整体积保持为9 mL , 其余操作不变, 记录OD 值, 计算加入红细胞SOD 抽提液后的自氧化速率.

4． SOD 标准品活性的测定. 　盛有SOD 标准品冻干粉的安瓿瓶打开后, 注入1 mL 双蒸水, 充分溶解, 用微量进样器取适量, 稀释后, 作为待测样, 加入对应体积的T ris2HCL 缓冲液使整体积为9 mL ,测定同上.

5． 酶活性的计算公式.

单位体积活性(u·mL - 1) = （原自氧化速率- 加样后速率）/

（原自氧化速率×0. 5） × 1/（加样量(mL ) ×反应液整体积(mL ) ×样液稀释倍数

式中, 每毫升反应液中, 每分钟抑制连苯三酚自氧化速率百分之50 的酶量为一个酶活性单位.

以检测血液中SOD的活性作为例子：

1．取小鼠新鲜血液500 微升置于4mL 生理盐水中, 混匀, 1500 r/m in 离心5m in, 弃上清液, 将沉淀用生理盐水洗涤3 次, 弃去上清液, 加入2 mL 双蒸水, 搅拌, 然后依次再加入冷乙醇1 mL , 氯仿1 mL , 4000 r/m in 离心15 m in,弃沉淀, 上清液即为红细胞(RBC) SOD 抽提液, 供测SOD 活性使用.

2． 连苯三酚自氧化速率的测定. 　在3 cm 光径比色皿中加入9 mL 50mmol/L , pH 8. 2 Tris HCL 缓冲液后, 放入721 分光光度计, 于420 nm 处调OD 值为0 作为对照后, 加入适量100mmol/L 连苯三酚溶液搅匀, 以加入时为零点, 每隔30 s 测OD 值一次, 要求自氧化速率控制在0.070 OD/m in 左右.

3． 红细胞SOD 抽提液的活力测定. 　第一测连苯三酚的自氧化速率, 而后向Tris-HCL 缓冲液中加样, 同时一定程度上减少缓冲液, 使反应整体积保持为9 mL , 其余操作不变, 记录OD 值, 计算加入红细胞SOD 抽提液后的自氧化速率.

4． SOD 标准品活性的测定. 　盛有SOD 标准品冻干粉的安瓿瓶打开后, 注入1 mL 双蒸水, 充分溶解, 用微量进样器取适量, 稀释后, 作为待测样, 加入对应体积的T ris2HCL 缓冲液使整体积为9 mL ,测定同上.

5． 酶活性的计算公式.单位体积活性(u·mL - 1) = （原自氧化速率- 加样后速率）/（原自氧化速率×0. 5） × 1/（加样量(mL ) ×反应液整体积(mL ) ×样液稀释倍数式中, 每毫升反应液中, 每分钟抑制连苯三酚自氧化速率百分之50 的酶量为一个酶活性单位.

酶活力国际单位：在特定条件下,1分钟内转化1微摩尔底物,或者底物中1微摩尔相关基团所需的酶量,称为一个国际单位（IU,又称U）.

另外一个国际酶学会议规定的酶活力单位是Kat,规定为：在适条件下,1秒钟能使1摩尔底物转化的酶量.

Kat和U的换算关系：1 Kat=6×107U,1U=16.67n Kat

酶的一定程度上pH，就是可以让酶发挥作用的好pH。酶在适pH范围内表现出活性，大于或小于适pH，活性降低。合适pH可能是一个范围，不一样的酶可能有不一样的适pH。例如，胃蛋白酶的适pH为2～3。而唾液淀粉酶的适PH约为6.8，看它所身处的环境吧。可以按照我们适用条件来选择酶，例如，在一个地方洗衣服，要按照当地水的pH来选择加酶洗衣粉。（这个例子是我自己的理解）。

每一种酶只可以在一定限度的pH范围内才表现活力，酶表现大活力时的pH称为酶的适pH。酶反应的适pH对酶活性的影响主要是：适pH的微小偏离能够让酶活性部位的基团离子化出现变化而降低酶的活性；很大偏离时，维护酶三维结构的不少非共价键受到干扰，致使酶蛋白的变性。

酶的适pH不是固定的常数，受酶的纯度、底物的种类和浓度、缓冲液的种类和浓度等的影响。

大多数情况下酶的适pH在4~8当中，植物和微生物体内的酶适pH多在4.5~6.5,而动物体内的适pH多在6.5~8，多在6.8左右。

某酶制剂的比活力为42单位/mg蛋白质,每ml含12mg蛋白质

(1)计算1ml反应液中含5μl酶制剂时的反应初速度

(2)若1ml反应液内含5μl酶制剂,在10分钟内消耗底物多少?

某酶的Km为9.4×10-3mol /L,假设该反应的V max是44μmol/L每分钟,在底物浓度为4×10-4mol/L和抑制剂浓度为5×10-4mol/L的情况下：（1）若为竞争性抑制,其反应速率多大?（2）若为非竞争抑制,其反应速率多大?（K i是3×10-4）

唾液淀粉酶为6.6-7.1 温度37-38 胰蛋白酶为7.8-8.5 温度37-38 胃蛋白酶为2-3 温度37-38 凝血酶7-9 温度37-38 马铃薯的酪氨酸酶活性合适的PH是8.2，适合的温度时40度。 过氧化氢酶6.8 温度37-38 就清楚这些了。。

100FGB/g中酶活单位是生产方自己定义的，故此，大多数情况下没办法与u/g换算，只可以自己测定酶活。

你要做酶实验，酶添加量只可以按照你的物料特性做单原因实验，因为底物种类及浓度、温度、pH等和添加比例是相互影响的。