化学发光酶免疫分析的内容具体是怎样的?为了帮助检验职称考生了解,华宇医药职称考试网为大家整理如下:
化学发光酶免疫分析(CLEIA)是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗体(或抗原),与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,经洗涤后,加入底物(发光剂),酶催化和分解底物发光。
(一)辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析
采用辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体(或抗原),与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,这时加入鲁米诺发光剂、H2O2和化学发光增强剂使其产生化学发光。
(二)碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析
以碱性磷酸酶(ALP)标记抗体(或抗原),反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,加入AMPPD发光剂,碱性磷酸酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。
化学发光酶免疫分析的特点:
①属酶免疫测定范畴,测定过程与ELISA相似,仅后一步酶反应的底物改为发光剂和测定的仪器为光信号检测仪;
②酶标记抗原或抗体结合稳定;
③酶催化鲁米诺、AMPPD等发光剂发出的光稳定,持续时间长,便于记录和测定。
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