考马斯亮蓝法测定的蛋白质溶液浓度不可以太高,因为蛋白质浓度高时,游离染料的含量大为减少,可能会造成标准曲线的非线性。
按照染料试剂在未与蛋白质结合以前本身为棕褐色,在465nm 下有吸收,可采取595nm 和465nm 下吸光度的比值作图,来修正游离染料的耗尽,提升标准曲线的线性和测定的精确度。
属于三苯甲烷类染料,可与蛋白质形成很强的非共价复合体.考马斯亮蓝R250多用于聚丙烯酰胺凝胶电泳后蛋白质条带的染色;考马斯亮蓝G250是布拉德福德(Bradford)蛋白质定量试剂的主要成分.
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考马斯亮蓝法如何选择高浓度或低浓度? 考马斯亮蓝法测定的蛋白质溶液浓度不可以太高,因为蛋白质浓度高时,游离染料的含量大为减少,可能会造成标准曲线的非线性。 按照染料试剂在未与蛋白质结合以前本身为棕褐色,在...
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