
考马斯亮蓝(coomassie brilliant blue)一定范围内与蛋白质浓度成正比,因为这个原因可用于蛋白质的定量测定。
考马斯亮蓝有G-250和R-250两种。这当中考马斯亮蓝G-250因为与蛋白质的结合反应十分快速,经常会用到来作为蛋白质含量的测定。
考马斯亮蓝R-250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是,可以被洗脱下去,故此,可以用来对电泳条带染色。
蛋白质它可以跟不少试剂出现颜色的反应.比如在鸡蛋白溶液中滴入一滴的浓硝酸,则鸡蛋白溶液会呈黄色的,这个原理是因为蛋白质(含苯环结构)与浓硝酸出现了颜色反应.还它还可以用双缩脲试剂对其进行检验,该试剂遇蛋白质变紫的。
经常会用到的蛋白质染色试剂分为已考马斯亮蓝为代表的有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。
这当中考马斯亮蓝染色法的应用较为广泛,现在将其与其他的蛋白质染色方式(主要是银染法)作一比较,帮各位考生更好地去选择适合的蛋白质染色方式。
蛋白质的染色经常会用到的有4类:有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。
这当中有机试剂染色以考马斯亮蓝染色法(Coomasie brilliant blue,CBB)为代表,在蛋白质分析中经常会用到,但对低丰度蛋白质的显现较差;银染灵敏度虽高,却常与质谱不兼容;荧光染色以SYPRO试剂为主,蛋白质检测灵敏度高,能兼容质谱,但因为需配备特殊的检测仪器及试剂的昂贵,未被作为常见方式使用;而同位素显色则存在安全性和操作局限性等问题。
因为这个原因,筛选简单方便、节约、检测灵敏度高、质谱兼容的蛋白质着色法是蛋白质组研究所需。
因为考马斯亮蓝染色法的广泛运用,近几年来就考马斯亮蓝染色法在提升其灵敏性方面研究者们作了不少改进,方式很多,评价不一。
我们在作双向凝胶电泳时,将经常会用到的几种考马斯亮蓝染色法及银染进行了比较,并就其染色影响原因作出分析。……具体资料请参考:on http://www.bio1000.com/experiment/protein/351913.html
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考马斯亮蓝的应用? 考马斯亮蓝(coomassie brilliant blue)一定范围内与蛋白质浓度成正比,因为这个原因可用于蛋白质的定量测定。 考马斯亮蓝有G-250和R-250两种。这当中考马斯亮蓝G-250因为与蛋白质的结合反应十分快速,经常会用...
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