考马斯亮蓝g250是否有毒，sds电泳考马斯亮蓝染色

考马斯亮蓝g250是不是有毒？

属于三苯甲烷类染料，可与蛋白质形成很强的非共价复合体。考马斯亮蓝R250多用于聚丙烯酰胺凝胶电泳后蛋白质条带的染色；考马斯亮蓝G250是布拉德福德(Bradford)蛋白质定量试剂的主要成分。

sds-page电泳后，用考马斯亮蓝直接染色和做wb的目标有何不一样？

一个是用肉眼直接观测目标蛋白的总体位置，一个是通过转膜，一抗二抗结合，ECL显影得到目标蛋白的位置及大小

考马斯亮蓝有几种类型？

蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化，以此改变这些染料的光吸收。

在些基础上发展了蛋白质染色测定方式。

涉及的指示剂有甲基橙、考马斯亮蓝、溴甲酚绿和溴甲酚紫。

现在广泛使用的染料是考马斯亮蓝。

考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色，当它与蛋白质通过范德华键结合后，变为蓝色，且在蛋白质一定浓度范围内满足比尔定律，可以在595nm处比色测定。

2—5分钟即呈大光吸收，至少稳定1小时。

在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内都可以。

该法操作简单方便快速，消耗样品量少，但不一样蛋白质当中差异大，且标准曲线线性差。

高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。

缓冲液浓度过高时，改变测定液pH值会影响显色。

考马斯亮蓝染色能力强，比色杯不洗干净会影响光吸收值，不可用石英怀测定

考马斯亮蓝与蒸馏水反应为什么变绿？

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中，使用的水低要求是蒸馏水，更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制，标准曲线的制作都要用到水。

假设不是为了让用蒸馏水，可能水里面会有一部分游离的离子或者电解质，会影响试剂配制的准确性，干扰实验结果。

而水中残留的有机物等可能会和考马斯亮蓝出现变色反应，这样制作的标准曲线会比实质上值偏高，致使后浓度检测的结果比实质上结果偏低。

司法考试备考资料及辅导课程

司法考试培训班-名师辅导课程