考马斯亮蓝测定蛋白质浓度是较经常会用到的方式,误差可尽可能减到小,需注意:测定OD值前,将分光光度计早一点预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐离子不影响实验结果,但去污剂,如TRITONX-100,SDS等,会严重干扰实验结果。
考马斯亮蓝G250的配制:称取100mg考马斯亮蓝G一250,溶于50ml90%乙醇中,加入85%的磷酸100ml,后用蒸馏水定容到1000ml。此溶液在常温下可放置30天。
考马斯亮蓝100ml:取10mgG一250,溶于5ml的95%乙醇中,这个时候溶液为蓝色,再加入了10ml的85%的磷酸,溶液为血红色,可是加水定容到100ml时又成为了蓝色。
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