考马斯亮蓝测定蛋白质浓度是较经常会用到的方式,误差可尽可能减到小,需注意:测定OD值前,将分光光度计早一点预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐离子不影响实验结果,但去污剂,如TRITONX-100,SDS等,会严重干扰实验结果。
bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色,用分光光度计在吸光度595nm处读数,通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线,再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利原因主要是特殊蛋白的结构,缓冲液组分中有干扰试剂等。
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