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考马斯亮蓝反应现象,考马斯亮蓝g250法测定蛋白质含量如何计算

时间:2023-06-30 14:04来源:华宇考试网收集整理作者:山东司法考试
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考马斯亮蓝反应现象

考马斯亮蓝反应情况?

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中,使用的水低要求是蒸馏水,更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制,标准曲线的制作都要用到水。

假设不是为了让用蒸馏水,可能水里面会有一部分游离的离子或者电解质,会影响试剂配制的准确性,干扰实验结果。

而水中残留的有机物等可能会和考马斯亮蓝出现变色反应,这样制作的标准曲线会比实质上值偏高,致使后浓度检测的结果比实质上结果偏低。

考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量时,如何不要测定中产生误差,不要样品的OD值低于空白对照的情况出现?

考马斯亮蓝测定蛋白质浓度是较经常会用到的方式,误差可尽可能减到小,需注意:测定OD值前,将分光光度计早一点预热至少30分钟,可保证准确性;配制好的考马斯亮蓝溶液应放于4度保存备用;盐离子不影响实验结果,但去污剂,如TRITONX-100,SDS等,会严重干扰实验结果。

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