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cdna文库原理,cdna文库是指什么

时间:2023-07-09 09:54来源:华宇考试网收集整理作者:司法考试分数线
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cdna文库原理

cdna文库原理?

1. cdna文库是一种用于基因表达研究的工具,可以将细胞或组织中的mRNA转录成cDNA,然后故将他克隆到载体中,构建成文库。2. cdna文库的原理是利用反转录酶将mRNA转录成cDNA,然后利用DNA聚合酶将cDNA扩增,再故将他克隆到载体中,构建成文库。这样完全就能够得到一个包含细胞或组织中全部基因表达信息的文库。3. cdna文库的应用很广泛,可以用于基因克隆、基因表达分析、蛋白质互作研究等领域。同时,随着高通量测序技术的蓬勃发展和进步,cdna文库也成为了RNA测序的重要工具之一。

经典cDNA文库构建的基本原理:用Oligo(dT)作逆转录引物,或者用随机引物,给所合成的cDNA 加上一定程度上的连接接头,连接到一定程度上的载体中取得cDNA文库。

其基本步骤涵盖:

(1)mRNA的提纯获取优质的mRNA是构建优质的cDNA文库的重点步骤之一。

(2)cDNA第一条链的合成。

(3)cDNA第二条链的合成。

(4)双链cDNA的修饰。

(5)双链cDNA的分子克隆。

(6)cDNA文库的扩增。

(7)cDNA文库鉴定评价。

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