双氧水使蛋白质变性后加考马斯亮蓝测样品中，folin酚法和考马斯亮蓝法的优缺

双氧水使蛋白质变性后，加考马斯亮蓝测样品中蛋白含量会不会有影响？

有影响 考马斯亮蓝测定蛋白质的原理：考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。

考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者大光吸收在465nm，后者在595nm。在一定蛋白质浓度范围内（0～100μg/ml），蛋白质－色素结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比。当用双氧水作用蛋白质后，蛋白质结构会出现变化，致使疏水区的外漏，原来的水化膜被破坏，这样再加入考马斯亮蓝，他与蛋白质的结合位点增多，会使测定值偏大，不可以正确测出蛋白质的浓度了。

folin酚法与考马斯亮蓝法和紫外吸收法的优缺点？

1．蛋白质测定的Folin-酚比色法（即Lowry法）的定量范围为5～100μg蛋白质，灵敏度高；但操作要费较长时间，且Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨氨酸导致，因为这个原因样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用；不一样蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不一样而使显色强度也稍有不一样。 紫外吸收法测蛋白质含量快速、简单方便、不消耗样品，低浓度盐类不干扰测定。

但该法的缺点是：

（1）针对测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异很大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。

（2）若样品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，出现很大干扰。

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