凯氏定氮法的优缺点,蛋白质测定的方法有哪些,各有什么优缺点

凯氏定氮法的优缺点?
凯氏定氮仪优点
针对全部样品的测定都适用是凯氏定氮法的优点。可以在测定动、植物的各自不同的组织、器官还有食品、土壤等成分复杂的蛋白质的含量时被使用。非常是样品溶液浑浊,用其他方式不可以测定,可靠的结果可以通过采取凯氏法取得。
凯氏定氮仪缺点
1、和理论含氮量相比,含碱性氨基酸、酰胺和小分子量氨基酸(甘氨酸、丙氨酸等)偏多的蛋白质含氮量明显很高,致使测定结果偏高。
2、有着相当麻烦的操作过程,要求操作者具有很高的技术熟练度,实验室空气中氨含量会对其出现影响。
3、测定值会因为样品中的非蛋白氮而偏高,故此在测定前需先将与样品共存的非蛋白氮去除。
优点(1)可用于全部食品的蛋白质分析中;(2)操作相对比较简单;(3)实验费用很低;(4)结果准确,是一种测定蛋白质的经典方式;(5)用改进方式(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质
缺点(1)后测定的是总有机氮,而不只是蛋白质氮;(2)实验时间太长(至少需2h才可以完成);(3)精度差,精度低于双缩脲法;(4)所用试剂有腐蚀性
蛋白质的测定方式及其优缺点?
1、凯氏定氮法
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方式。也就是在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。
因为蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,所以,法是经典的蛋白质定量方式。
优点:可用于全部食品的蛋白质分析中;操作相对比较简单;实验费用很低;结果准确是一种测定蛋白质的经典方式;用改进方式(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质。
缺点:凯氏定氮法只是一个氧化还原反应,把低价氮氧化并转为氨盐来测定,而不可以把高价氮还原为氮盐的形式,故此,不可以测出物质中全部价态的氮含量。
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