考马斯吸光度适用范围，考马斯亮蓝溶液怎么配

考马斯亮蓝显色法的基本原理是按照蛋白质可与考马斯亮蓝G-250 定量结合。当考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后，其对可见光的大吸收峰从 465nm 变为 595nm。

在考马斯亮蓝 G-250 过量且浓度恒定的情况下，当溶液中的蛋白质浓度不一样时，就可以有不一样量的考马斯亮蓝 G-250 从吸收峰为 465nm 的形式转变成吸收峰为 595nm 的形式，而且，这样的转变有一定的数量关系。

一般情况，当溶液中的蛋白质浓度增多时，显色液在 595nm 处的吸光度基本能保持线性增多，因为这个原因可以用考马斯亮蓝 G-250 显色法来测定溶液中蛋白质的含量。

考马斯亮蓝G250的配制：称取100mg考马斯亮蓝G一250，溶于50ml90％乙醇中，加入85％的磷酸100ml，后用蒸馏水定容到1000ml。此溶液在常温下可放置30天。

考马斯亮蓝100ml：取10mgG一250，溶于5ml的95％乙醇中，这个时候溶液为蓝色，再加入了10ml的85％的磷酸，溶液为血红色，可是加水定容到100ml时又成为了蓝色。

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0.25% 考马斯亮蓝R-250 ：100ml

甲醇： 45ml

蒸馏水： 45ml

冰乙酸： 10ml

考马斯： 0.25g

考马斯亮蓝脱色液：1L

乙醇： 50ml

冰乙酸： 100ml

蒸馏水： 850m