考马斯亮蓝溶液配制注意事项，考马斯亮蓝遇石英比色皿

考马斯亮蓝溶液配制须知？

考马斯亮蓝G250的配制：称取100mg考马斯亮蓝G一250，溶于50ml90％乙醇中，加入85％的磷酸100ml，后用蒸馏水定容到1000ml。此溶液在常温下可放置30天。

考马斯亮蓝100ml：取10mgG一250，溶于5ml的95％乙醇中，这个时候溶液为蓝色，再加入了10ml的85％的磷酸，溶液为血红色，可是加水定容到100ml时又成为了蓝色。

为什么用考马斯亮蓝法时不可以用石英比色皿？

石英比色皿在可见光区，紫外光区都可以用，故此，用考马斯亮蓝显色法测定蛋白质含量，可以用石英比色皿。

考马斯亮蓝法与蛋白反应条件？

在酸性的反应条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，致使大吸收峰由465 nm 变为595 nm，同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，蛋白质的浓度可以按照标准曲线而确定。

故此，考马斯亮蓝法测定蛋白质的条件是在酸性条件下。

考马斯亮蓝有毒吗？

有毒。

考马斯亮蓝属于三苯甲烷类染料,可与蛋白质形成很强的非共价复合体.考马斯亮蓝R250多用于聚丙烯酰胺凝胶电泳后蛋白质条带的染色；考马斯亮蓝G250是布拉德福德(Bradford)蛋白质定量试剂的主要成分。

考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,大光吸收在465nm；当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有大光吸收.其光吸收值与蛋白质含量成正比。

有

考马斯亮蓝为一种三苯甲烷类染料，可与蛋白质通过范德华力作用形成很强的非共价复合体。考马斯亮蓝染色法以非常高的重复性和灵敏度还有很好的质谱兼容性，成为现在一种使用较为广泛的蛋白质染色方式，其在一定范围内和蛋白浓度呈正比，因为这个原因也用于蛋白定量检测

500毫升考马斯亮蓝怎么配？

考马斯亮蓝G250的配制：称取100mg考马斯亮蓝G一250，溶于50ml90％乙醇中，加入85％的磷酸100ml，后用蒸馏水定容到1000ml。此溶液在常温下可放置30天。

考马斯亮蓝100ml：取10mgG一250，溶于5ml的95％乙醇中，这个时候溶液为蓝色，再加入了10ml的85％的磷酸，溶液为血红色，可是加水定容到100ml时又成为了蓝色。

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