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考马斯亮蓝的应用,考马斯亮蓝g250法测定蛋白质含量的优缺点

时间:2023-06-02 17:29来源:华宇考试网收集整理作者:山西司法考试
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考马斯亮蓝的应用

考马斯亮蓝的应用?

考马斯亮蓝(coomassie brilliant blue)一定范围内与蛋白质浓度成正比,因为这个原因可用于蛋白质的定量测定。

考马斯亮蓝有G-250和R-250两种。这当中考马斯亮蓝G-250因为与蛋白质的结合反应十分快速,经常会用到来作为蛋白质含量的测定。

考马斯亮蓝R-250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是,可以被洗脱下去,故此,可以用来对电泳条带染色。

考马斯亮蓝g-250法测定蛋白质含量的优势?

考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方式的优点是:

1.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右时间内达到平衡,完成反应十分快速;

2.其结合物在室温下1h内保持稳定。

3.该法试剂配制简单,操作简单方便快捷,反应很灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1,000μg/mL是一种经常会用到的微量蛋白质迅速测定方式。 考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因为这个原因可用于蛋白质的定量测定。

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