酶的总活力怎么求,酶的比活力怎么计算

酶的总活力怎么求?
IU的单位是微摩尔/分钟。0.3摩尔等于300,000微摩尔,这样算0.1ml的酶活力是转化摩尔数/时间=30,000IU。故此,1ml的酶活力就是10倍300,000IU。
酶活力(enzyme activity)也称酶活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可以用在一定条件下,它所催化的某一化学反应的转化速率来表示,即酶催化的转化速率越快,酶的活力就越高。
酶的比活力怎样计算?
酶的比活力=酶活力/蛋白量(mg),转换数是每秒每个酶分子转换底物的分子数,或者每秒每微摩尔酶转换底物的微摩尔数。转换数=酶活力/微摩尔数,微摩尔数=蛋白量/相对分子质量故此转换数=比活*相对分子质量,然后再对单位进行统一就行了
酶的活性单位是什么?
酶活力单位:用来表示酶活力大小的单位,一般用酶量来表示。1961年国际酶学会议定义酶活力国际单位,规定为:在特定条件下,1分钟内转化1微摩尔底物,或者底物中1微摩尔相关基团所需的酶量,称为一个酶活力国际单位IU。
1963年国际生化协会酶学委员会推荐采取国际单位(IU)来统一表示酶活性的大小.1976年对酶活性单位定义为:在特定的条件下,1 min能转化1μmol底物的酶量,即1IU=1μmol/min.现在国内外大多数临床实验室常省略国际二字,马上就要IU简写为U.1979年国际生物化学协会为了使酶活性单位与国际单位制(SI)的反应速率相完全一样,推荐用Katal单位(也称催量,Kat).也就是在规定条件下,每秒(s)钟催化转化1 mol底物的酶量,即1katal=1mol.s.我们国内法定计量单位制中,酶催化活性单位为katal,因表示血浆中酶量时过大,故经常会用到mkatal或 nkatal表示.IU和katal间关系请看下方具体内容:1katal=6000U,1U=16.67nmol.s=16.67nkatal.
SOD单位活力怎么计算?
以检测血液中SOD的活性作为例子:
1.取小鼠新鲜血液500 微升置于4mL 生理盐水中, 混匀, 1500 r/m in 离心5m in, 弃上清液, 将沉淀用生理盐水洗涤3 次, 弃去上清液, 加入2 mL 双蒸水, 搅拌, 然后依次再加入冷乙醇1 mL , 氯仿1 mL , 4000 r/m in 离心15 m in,
弃沉淀, 上清液即为红细胞(RBC) SOD 抽提液, 供测SOD 活性使用.
2. 连苯三酚自氧化速率的测定. 在3 cm 光径比色皿中加入9 mL 50mmol/L , pH 8. 2 Tris HCL 缓冲液后, 放入721 分光光度计, 于420 nm 处调OD 值为0 作为对照后, 加入适量100mmol/L 连苯三酚溶液搅匀, 以加入时为零点, 每隔30 s 测OD 值一次, 要求自氧化速率控制在0.070 OD/m in 左右.
3. 红细胞SOD 抽提液的活力测定. 第一测连苯三酚的自氧化速率, 而后向
Tris-HCL 缓冲液中加样, 同时一定程度上减少缓冲液, 使反应整体积保持为9 mL , 其余操作不变, 记录OD 值, 计算加入红细胞SOD 抽提液后的自氧化速率.
4. SOD 标准品活性的测定. 盛有SOD 标准品冻干粉的安瓿瓶打开后, 注入1 mL 双蒸水, 充分溶解, 用微量进样器取适量, 稀释后, 作为待测样, 加入对应体积的T ris2HCL 缓冲液使整体积为9 mL ,测定同上.
5. 酶活性的计算公式.
单位体积活性(u·mL - 1) = (原自氧化速率- 加样后速率)/
(原自氧化速率×0. 5) × 1/(加样量(mL ) ×反应液整体积(mL ) ×样液稀释倍数
式中, 每毫升反应液中, 每分钟抑制连苯三酚自氧化速率百分之50 的酶量为一个酶活性单位.
以检测血液中SOD的活性作为例子:
1.取小鼠新鲜血液500 微升置于4mL 生理盐水中, 混匀, 1500 r/m in 离心5m in, 弃上清液, 将沉淀用生理盐水洗涤3 次, 弃去上清液, 加入2 mL 双蒸水, 搅拌, 然后依次再加入冷乙醇1 mL , 氯仿1 mL , 4000 r/m in 离心15 m in,弃沉淀, 上清液即为红细胞(RBC) SOD 抽提液, 供测SOD 活性使用.
2. 连苯三酚自氧化速率的测定. 在3 cm 光径比色皿中加入9 mL 50mmol/L , pH 8. 2 Tris HCL 缓冲液后, 放入721 分光光度计, 于420 nm 处调OD 值为0 作为对照后, 加入适量100mmol/L 连苯三酚溶液搅匀, 以加入时为零点, 每隔30 s 测OD 值一次, 要求自氧化速率控制在0.070 OD/m in 左右.
3. 红细胞SOD 抽提液的活力测定. 第一测连苯三酚的自氧化速率, 而后向Tris-HCL 缓冲液中加样, 同时一定程度上减少缓冲液, 使反应整体积保持为9 mL , 其余操作不变, 记录OD 值, 计算加入红细胞SOD 抽提液后的自氧化速率.
4. SOD 标准品活性的测定. 盛有SOD 标准品冻干粉的安瓿瓶打开后, 注入1 mL 双蒸水, 充分溶解, 用微量进样器取适量, 稀释后, 作为待测样, 加入对应体积的T ris2HCL 缓冲液使整体积为9 mL ,测定同上.
5. 酶活性的计算公式.单位体积活性(u·mL - 1) = (原自氧化速率- 加样后速率)/(原自氧化速率×0. 5) × 1/(加样量(mL ) ×反应液整体积(mL ) ×样液稀释倍数式中, 每毫升反应液中, 每分钟抑制连苯三酚自氧化速率百分之50 的酶量为一个酶活性单位.
cat酶活性计算的公式?
以1min内A240减少0.1的酶量为1个酶活单位(μ)。
△A240 * Vt CAT活性(U/(g*min))=------- 0.1 * Vs * t * W 式中 (As1+As2) △A240=As0 - ------ 2 As0 :加入失活酶液的对照管吸光值; As1,As2 : 样品管吸光值; Vt :粗酶提取液整体积(ml); Vs :测定用粗酶提取液体积(ml); W : 样品鲜重(g); 0.1 : A240每下降0.1为1个酶活单位(μ); t : 过氧化氢到后一次读数时间(min)酶活性的概念,酶对化学反应的什么?主要影响原因是什么和什么?
酶活力也称为酶活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可用在一定条件下,酶催化某一化学反应的速度来表示,酶催化反应速度愈大,酶活力愈高,反之活力愈低。测定酶活力实质上就是测定酶促反应的速度。酶促反应速度可用单位时间内、单位体积中底物的减少量或产物的增多量来表示
温度和ph偏高或偏低,酶的活性都会明显降低,为什么?
温度和ph偏高或偏低,酶的活性都会明显降低是因为温度和ph对酶活性的影响表现为双重作用各自不同的酶在适温度范围内还有适pH时,酶活性顶级。
因为酶是蛋白质,随着温度升高而使酶一步一步变性,酶活力渐渐减少。
随着pH偏低或者偏高,酶也会出现变性,酶的活性也是明显降低。
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