考马斯亮兰R250液体怎么配置测蛋白质浓，考马斯亮蓝g250法测蛋白质含量实验报

考马斯亮兰R250液体，怎么配置测蛋白质浓度？

R250不可以用来测蛋白质浓度的，G250用来测蛋白质浓度100mg考马斯亮蓝G-250溶于50 ml 95%乙醇，加入100 ml磷酸然后补加水至1 L，Whatman1号滤纸过滤。

考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方式有哪些优点？

　　考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方式的优点是：　　

1.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右时间内达到平衡，完成反应十分快速；　　

2.其结合物在室温下1h内保持稳定。　　

3.该法试剂配制简单，操作简单方便快捷，反应很灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1,000μg/mL是一种经常会用到的微量蛋白质迅速测定方式。　　考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因为这个原因可用于蛋白质的定量测定。

用考马斯亮蓝染蛋白胶方式？

马斯亮蓝染色是用考马斯亮蓝进行蛋白质染色的方式。

1 电泳结束后， 取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，保证染色液可以充分覆盖凝 胶。置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时 间。 注：详细的染色时间主要还是看凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚， 温度很低，则染色时间宜一定程度上延长。凝胶较薄，温度非常高，则染色时 间可以一定程度上缩短。一般染色至凝胶的颜色和染色液的颜色很接近， 在染色液中基本上看不清凝胶时，可以觉得已染色充分。染色2-4 个小 时或更长时间不会对后的染色效果出现不好的错误影响。

2 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3 次。

3 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，保证脱色液可以充分覆盖凝胶。 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色 4-24 小时。这个时间段更改替换脱色液2-4 次，直至蓝色背景差不多都被脱去，并且蛋白条带染 色效果达到预期。一般蛋白条带在脱色1-2 小时后就可以产生。

考马斯亮蓝g-250法测定蛋白质含量的优势？

考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方式的优点是：

1.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右时间内达到平衡，完成反应十分快速；

2.其结合物在室温下1h内保持稳定。

3.该法试剂配制简单，操作简单方便快捷，反应很灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1,000μg/mL是一种经常会用到的微量蛋白质迅速测定方式。 考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因为这个原因可用于蛋白质的定量测定。

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