考马斯亮蓝反应现象，考马斯亮蓝有毒吗?致癌吗

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中，使用的水低要求是蒸馏水，更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制，标准曲线的制作都要用到水。

假设不是为了让用蒸馏水，可能水里面会有一部分游离的离子或者电解质，会影响试剂配制的准确性，干扰实验结果。

而水中残留的有机物等可能会和考马斯亮蓝出现变色反应，这样制作的标准曲线会比实质上值偏高，致使后浓度检测的结果比实质上结果偏低。

有毒。

考马斯亮蓝属于三苯甲烷类染料,可与蛋白质形成很强的非共价复合体.考马斯亮蓝R250多用于聚丙烯酰胺凝胶电泳后蛋白质条带的染色；考马斯亮蓝G250是布拉德福德(Bradford)蛋白质定量试剂的主要成分。

考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,大光吸收在465nm；当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有大光吸收.其光吸收值与蛋白质含量成正比。

有

考马斯亮蓝为一种三苯甲烷类染料，可与蛋白质通过范德华力作用形成很强的非共价复合体。考马斯亮蓝染色法以非常高的重复性和灵敏度还有很好的质谱兼容性，成为现在一种使用较为广泛的蛋白质染色方式，其在一定范围内和蛋白浓度呈正比，因为这个原因也用于蛋白定量检测

考马斯亮蓝显色法的基本原理是按照蛋白质可与考马斯亮蓝G-250 定量结合。当考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后，其对可见光的大吸收峰从 465nm 变为 595nm。

在考马斯亮蓝 G-250 过量且浓度恒定的情况下，当溶液中的蛋白质浓度不一样时，就可以有不一样量的考马斯亮蓝 G-250 从吸收峰为 465nm 的形式转变成吸收峰为 595nm 的形式，而且，这样的转变有一定的数量关系。

大多数情况下情况，当溶液中的蛋白质浓度增多时，显色液在 595nm 处的吸光度基本能保持线性增多，因为这个原因可以用考马斯亮蓝 G-250 显色法来测定溶液中蛋白质的含量。

在酸性的反应条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，致使大吸收峰由465 nm 变为595 nm，同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，蛋白质的浓度可以按照标准曲线而确定。

故此，考马斯亮蓝法测定蛋白质的条件是在酸性条件下。

蛋白质它可以跟不少试剂出现颜色的反应．比如在鸡蛋白溶液中滴入一滴的浓硝酸,则鸡蛋白溶液会呈黄色的，这个原理是因为蛋白质（含苯环结构）与浓硝酸出现了颜色反应.并且它还可以用双缩脲试剂对其进行检验,该试剂遇蛋白质变紫的。

经常会用到的蛋白质染色试剂分为已考马斯亮蓝为代表的有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。

这当中考马斯亮蓝染色法的应用较为广泛，现在将其与其他的蛋白质染色方式(主要是银染法)作一比较，帮各位考生更好地去选择适合的蛋白质染色方式。

蛋白质的染色经常会用到的有4类：有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。

这当中有机试剂染色以考马斯亮蓝染色法(Coomasie brilliant blue，CBB)为代表，在蛋白质分析中经常会用到，但对低丰度蛋白质的显现较差；银染灵敏度虽高，却常与质谱不兼容；荧光染色以SYPRO试剂为主，蛋白质检测灵敏度高，能兼容质谱，但因为需配备特殊的检测仪器及试剂的昂贵，未被作为常见方式使用；而同位素显色则存在安全性和操作局限性等问题。

因为这个原因，筛选简单方便、节约、检测灵敏度高、质谱兼容的蛋白质着色法是蛋白质组研究所需。

因为考马斯亮蓝染色法的广泛运用，近几年来就考马斯亮蓝染色法在提升其灵敏性方面研究者们作了不少改进，方式很多，评价不一。

我们在作双向凝胶电泳时，将经常会用到的几种考马斯亮蓝染色法及银染进行了比较，并就其染色影响原因作出分析。……具体资料请参考：on http://www.bio1000.com/experiment/protein/351913.html

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中，使用的水低要求是蒸馏水，更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制，标准曲线的制作都要用到水。

假设不是为了让用蒸馏水，可能水里面会有一部分游离的离子或者电解质，会影响试剂配制的准确性，干扰实验结果。

而水中残留的有机物等可能会和考马斯亮蓝出现变色反应，这样制作的标准曲线会比实质上值偏高，致使后浓度检测的结果比实质上结果偏低。

考马斯亮蓝染色是用考马斯亮蓝进行蛋白质染色的方式中大多数情况下是优级纯纯度。