考马斯吸光度适用范围，用考马斯亮蓝g250法测定蛋白质的含量

考马斯亮蓝显色法的基本原理是按照蛋白质可与考马斯亮蓝G-250 定量结合。当考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后，其对可见光的大吸收峰从 465nm 变为 595nm。

在考马斯亮蓝 G-250 过量且浓度恒定的情况下，当溶液中的蛋白质浓度不一样时，就可以有不一样量的考马斯亮蓝 G-250 从吸收峰为 465nm 的形式转变成吸收峰为 595nm 的形式，而且，这样的转变有一定的数量关系。

大多数情况下情况，当溶液中的蛋白质浓度增多时，显色液在 595nm 处的吸光度基本能保持线性增多，因为这个原因可以用考马斯亮蓝 G-250 显色法来测定溶液中蛋白质的含量。

　　考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方式的优点是：　　

1.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右时间内达到平衡，完成反应十分快速；　　

2.其结合物在室温下1h内保持稳定。　　

3.该法试剂配制简单，操作简单方便快捷，反应很灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1,000μg/mL是一种经常会用到的微量蛋白质迅速测定方式。　　考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因为这个原因可用于蛋白质的定量测定。

蛋白质电泳（大多数情况下指sds-page）大多数情况下使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳的驱动力靠与蛋白质结合的sds上所带上的负电荷。

故此，一样点就是样品都是带负电荷的，从负极向正极移动，移动的距离都和样品的分子量相关。而且，这两个电泳体系可以相互交换使用。进行大分子蛋白质电泳时，可以考虑换用琼脂糖凝胶，因为该体系孔径大。相反，假设需精确到广大数碱基的dna电泳也可使用聚丙烯酰胺凝胶系统，因为使用该系统可以将相差一个碱基的两条dna链分开。

不一样点第一是样品不一样。这个就不需要多说了。其次是结果的观察方式不一样。dna电泳普遍使用eb做染料，在紫外灯下观察；而蛋白电泳使用的考马斯亮蓝染色，还要有经过脱色步骤，不过观察起来比较简单。还有就是胶体系的差别，dna电泳一般是一胶跑究竟，而蛋白质电泳则会有分离胶和浓缩胶之区别。

石英比色皿在可见光区，紫外光区都可以用，故此，用考马斯亮蓝显色法测定蛋白质含量，可以用石英比色皿。