怎么看显微镜图片的分辨率，什么叫显微镜的分辨率

显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的小间距的能力。

其计算公式是σ=λ/NA

式中σ为分辨率；λ为光线的波长；NA为物镜的数值孔径（NA=nsina/2,n为介质的折射率，a为孔径角，即样品对物镜孔径角）。可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个原因决定。NA值越大，照明光线波长越短，则σ值越小，分辨率就越高。

要提升分辨率，即减小σ值，可采用以下措施

（1） 降低波长λ值，使用短波长光源。

（2） 增大介质n值以提升NA值（NA=nsina/2）。

（3） 增大孔径角a值以提升NA值。

（4） 增多明暗反差。

显微物镜的分辨率即物面上能分开的短距离，由以下公式计算　　σ=0.61λ/NA　　这当中σ为显微物镜分辨率，λ为光源波长，NA为显微物镜的数值孔径。物镜只是达到第一级放大，并非达到人眼的分辨率。后面还需要由目镜第二级放大。光学显微镜中的分辨率是指能了解区分被检物体细微结构小间隔的能力。即相邻两个物点间小距离的能力。数码相机可以拍摄大图片的面积，就是这台数码相机的高分辨率，一般以像素（PX）为单位。现目前的数码相机产品，在像素（PX）标称上分为CCD像素（PX）和经软件优化后的像素（PX），后者大大高于前者。如某品牌现在流行的数码相机，其CCD像素（PX）为230万，而软件优化后的像素（PX）可达到330万。

金相显微镜的分辨率是指成像物体上能分辨出来的两物点间的距离。

金相显微镜因为光的干涉与衍射作用，分辨率只可以局限于0.2-0.5um当中。扫描电镜因为采取电子束作为光源，其分辨率可达到1-3nm当中，因为这个原因金相显微镜的组织观察属于微米级别分析。

衍射效应规定的分辨率计算公式：

要提升金相显微镜的分辨率，重要是要降低照明光源的波长。可见光波长为400-700nm，光学显微镜大多数情况下用黄绿光照明，故其分辨率极限约为200nm，即阿贝极限。

影响显微镜分辨率的原因有：

1、色差

色差是透镜成像的一个严重缺陷，出现在多色光为光源的情况下，单色光不出现色差。白光由红 橙 黄 绿 青 蓝 紫 七种组成，各自不同的光的波长不一样 ，故此，在通过透镜时的折射率也不一样，这样物方一个点，在像方则可能形成一个色斑。

色差大多数情况下有位置色差，放大率色差。位置色差使像在任何位置观察，都带有色斑或晕环，使像模糊不清。而放大率色差使像带有彩色边缘。

2、球差

球差是轴上点的单色相差是因为透镜的球形表面导致的。球差导致的结果是，一个点成像后，不在是个亮点，而是一个中间亮、边缘渐渐模糊的亮斑。以此影响成像质量。

球差的矫正常利用透镜组合来消除，因为凸、凹透镜的球差是相反的，可选配不一样材料的凸凹透镜胶合起来给予消除。旧型号显微镜，物镜的球差没有完全矫正，应与对应的补偿目镜配合，才可以达到纠偏效果。大多数情况下新型显微镜的球差完全由物镜消除。

3、慧差

慧差属轴外点的单色相差。轴外物点以大孔径光束成像时，发出的光束通过透镜后，不可以再相交一点，则一光点的像便会得到一逗点状，型如慧星，故称“慧差”。

4、像散

像散也是影响清晰度的轴外点单色相差。当视场很大时，边缘上的物点离光轴远，光束倾斜大，经透镜后则导致像散。像散使原来的物点在成像后变成两个分离并且相互垂直的短线，在理想像平面上综合后，形成一个椭圆形的斑点。像散是通过复杂的透镜组合来消除。

5、 场曲

场曲又称“像场弯曲”。当透镜存在场曲时，整个光束的交点不与理想像点重合，虽说每个特定点都可以得到清晰的像点，但整个像平面则是一个曲面。这样在镜检时不可以同时看清整个相面，给观察和照相导致困难。因为这个原因研究用显微镜的物镜大多数情况下都是平场物镜，这样的物镜已经矫正了场曲。

6、 畸变

前面所说各自不同的相差除场曲外，都影响像的清晰度。畸变是另一种性质的相差，光束的同心性不受到破坏。因为这个原因，影响不了像的清晰度，但使像与原物体比，在形状上导致失真。

（1） 当物体位于透镜物方二倍焦距以外时，则在像方二倍焦距以内、焦点以外形成变小的倒立实像；

（2） 当物体位于透镜物方二倍焦距上时，则在像方二倍焦距上形成同样大小的倒立实像；

（3） 当物体位于透镜物方二倍焦距以内，焦点以外时，则在像方二倍焦距以外形成放大的倒立实像；

（4） 当物体位于透镜物方焦点上时，则像方不可以成像；

（5） 当物体位于透镜物方焦点以内时，则像方也无像的形成，而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚像。

分辨率 显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的小间距，又称鉴别率。其计算公式是σ=λ/NA 式中σ为小分辨距离；λ为光线的波长；NA为物镜的数值孔径。可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个原因决定。NA值越大，照明光线波长越短，则σ值越小，分辨率就越高。要提升分辨率，即减小σ值，可采用以下措施:

（1） 降低波长λ值，使用短波长光源。

（2） 增大介质n值以提升NA值（NA=nsinu/2）。

（3） 增大孔径角u值以提升NA值。

（4） 增多明暗反差。

显微镜物镜分辨距离的计算公式：按照光学衍射理论，衍射光斑直径d＝Kλ／NA，若光斑为爱里圆斑，则强度沿径向降低为大值的1／2时，对应的K＝0.52，即d＝0.52λNA，焦深ΔZ＝λ／2NA2。可见，当NA值增大时，光斑直径d减小，促进提升测量头的横向及垂直分辨率，但是在物镜直径一定的情况下，这个时候镜头更为靠近被测工件表面，不利于测量头的调整，且系统波象差会随NA值的增大而加大，故需对NA值进行优化选择。

显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的小间距，又称鉴别率。其计算公式是σ=λ/na；式中σ为小分辨距离；λ为光线的波长；na为物镜的数值孔径。

故此，分辨率与目镜没相关系，主要还是看物镜

小分辨距离越小，分辨率越高。

第一，不一样的显微镜的分辨率带来一定不一样，小分辨距离=0.61λ/na，小分辨距离越小，分辨率越高，因为这个原因由公式可以看到提升物镜的数值孔径na，或者缩短光的波长，都可以提升分辨率，可见光的范围大约在390nm-670nm，而空气中的数值孔径大小高等于1，普通光学显微镜的极限分辨率是200nm左右。

现在因为科技的发展，已经产生了超分辨的光学显微镜，典型的就是ssim（结构化照明显微术）和n-storm（庄小威实验室的研究成果），分辨率分别达到了80nm和20nm（可以看蛋白质当中的相互作用）。因为这个原因，现在光学显微镜的分辨率高达到20nm