考马斯亮蓝反应现象，蛋白胶考马斯亮蓝染色染多久

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中，使用的水最低要求是蒸馏水，更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制，标准曲线的制作都要用到水。

假设不是为了让用蒸馏水，可能水里面会有一部分游离的离子或者电解质，会影响试剂配制的准确性，干扰实验结果。

而水中残留的有机物等可能会和考马斯亮蓝出现变色反应，这样制作的标准曲线会比实质上值偏高，致使最后浓度检测的结果比实质上结果偏低。

蛋白胶用考马斯亮蓝法大多数情况下染半可钟持续时间半年以上不掉色

蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化，以此改变这些染料的光吸收。

在些基础上发展了蛋白质染色测定方式。

涉及的指示剂有甲基橙、考马斯亮蓝、溴甲酚绿和溴甲酚紫。

现在广泛使用的染料是考马斯亮蓝。

考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色，当它与蛋白质通过范德华键结合后，变为蓝色，且在蛋白质一定浓度范围内满足比尔定律，可以在595nm处比色测定。

2—5分钟即呈最大光吸收，至少稳定1小时。

在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内都可以。

该法操作简单方便快速，消耗样品量少，但不一样蛋白质当中差异大，且标准曲线线性差。

高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。

缓冲液浓度过高时，改变测定液pH值会影响显色。

考马斯亮蓝染色能力强，比色杯不洗干净会影响光吸收值，不可用石英怀测定