Clontech酵母双杂系统中引入了一个AbA抗性报告基因,和X-α-Gal共用同一个Gal4开始子。虽然营养缺陷型筛选压力很高,但是,直接在四缺培养基上长得会很不好甚至直接不长。于是就引入了二缺上先用AbA筛一轮,并用X-α-Gal显色辅助判断,再转移到四缺培养基上,不要筛选不到的问题。
AH109是酿酒酵母菌株,属于真核细胞。大多数情况下的针对原核生物的抗生素比如卡那和氨苄对酵母是无效的,因为这个原因为了防止大肠杆菌等原核生物对酵母培养菌株污染,时常会在培养基中加入一部分氨苄和卡那霉素的抗生素,来抑制细菌菌的污染和生长。
酿酒酵母适宜的生长温度是28-30度,大多数情况下使用30度培养,温度超越32度可能致使细胞的死亡。
AH109酿酒酵母主要用于酵母双杂交系统,与Y187菌株一起配套使用,用于研究蛋白与蛋白当中的相互作用。
AH109酿酒酵母来源自于PJ69-2A菌株,含有ADE2和HIS3筛选标记(James et al.,1996).MEL1是一个内源性的GAL4响应基因。lacZ报告基因被导入进入PJ69-2A,以此构建成了AH109(A.Holtz, unpublished).菌株中的His3,ADE2和MEL1/LacZ报告基因是分别有三个完整的医院性的GAL4型响应开始子元件 -GAL1,GAL2和MEL1进行开始翻译的。
在制作AH109酿酒酵母甘油菌时,请别用4天以上的平板挑菌保存,尽可能使用新鲜的平板。
菌株特点:
AH109是酿酒酵母菌株,属于真核细胞。大多数情况下的针对原核生物的抗生素比如卡那和氨苄对酵母是无效的,因为这个原因为了防止大肠杆菌等原核生物对酵母培养菌株污染,时常会在培养基中加入一部分氨苄和卡那霉素的抗生素,来抑制细菌菌的污染和生长。
酿酒酵母适宜的生长温度是28-30度,大多数情况下使用30度培养,温度超越32度可能致使细胞的死亡。
AH109酿酒酵母主要用于酵母双杂交系统,与Y187菌株一起配套使用,用于研究蛋白与蛋白当中的相互作用。
AH109酿酒酵母来源自于PJ69-2A菌株,含有ADE2和HIS3筛选标记(James et al.,1996).MEL1是一个内源性的GAL4响应基因。lacZ报告基因被导入进入PJ69-2A,以此构建成了AH109(A.Holtz, unpublished).菌株中的His3,ADE2和MEL1/LacZ报告基因是分别有三个完整的医院性的GAL4型响应开始子元件-GAL1,GAL2和MEL1进行开始翻译的。
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